间歇性给药可抑制毒性
为了了解特异性T细胞亚群是否驱动PI3Kδ抑制的免疫病理，作者对不同的治疗方案中的结肠CD8+和CD4+T细胞进行了scRNA-seq检测。UMAP分析显示了5个不同的CD8+细胞簇和六个不同的CD4+T细胞簇(图4a，详细数据图6a)。两个实例中，作者证实了一个中央记忆(TCM)细胞亚群(簇0，红色)，表达高水平的Ccr7和Cd62L，一个TC1和TH1亚群表达高水平的干扰素γ转录本(簇3，蓝色表示TC1和簇1，赭石表示TH1），一个TC17和TH17亚群富集Il-17转录本(簇1，赭石表示TC17和簇2，绿色表示TH17)，以及一个表现出TC17(紫色)特征或TH17细胞(蓝色)的增殖亚群(图4b，c，详细数据图6b，c)。作者发现TC17和TH17亚群以及相关的增殖簇呈剂量依赖性富集，在连续给药方案中约占所有细胞的50%，而在其他治疗条件下几乎完全不存在(图4a，详细数据图6a)。此外，这些Il-17+簇中的细胞大量克隆扩增，在CD8+和CD4+T细胞中都表现出大量的细胞和克隆型重叠(图4d，e，详细数据图6d，e)，可能有助于其快速扩增。相反，先天性CD8+T细胞呈剂量依赖性减少(图4a–c)。最后，RNA速度分析表明致病性TC17和TH17亚群来自表达IFN-γ的祖细胞(图4c，f，详细数据图6c，f)。因此，TC17和TH17细胞维持了Ifng的高转录表达(图4c，详细数据图6c)。已知产生IL-17的细胞会引起结肠炎，先天性CD8+T细胞与控制炎症和结肠炎的发作有关，这些结果与之吻合。
图4：连续给药驱动致病性TC17反应。
图4的给药方案如图3c，d，UMAP分析治疗后第18天的肿瘤接种小鼠结肠组织中的可视化CD8+T细胞亚群(a)。簇中细胞基因表达的热图(b)。Sell也被称为Cd62l；Itgae也被称为Cd。不同簇中指示基因的源码解析-标准化表达水平(c)。UMAP空间中指示的亚群中细胞的克隆大小(d)。不同簇中CD8+T细胞之间的克隆重叠(e)。UMAP可视化的RNA速度分析描绘的CD8+T细胞可能的发育轨迹(f)。TC细胞，细胞毒性T细胞。
鉴于IL-10+ST2Treg细胞参与了可能导致结肠炎的IL-17反应的控制。作者的数据表明Il10-表达的ST2Treg细胞对PI3Kδ抑制非常敏感，导致其丰度降低，从而通过引起致病性TH17和TC17细胞的快速扩增而破坏肠道稳态，加上先天性CD8+T细胞的减少，引起结肠炎。间歇性PI3Kδi给药提供了降低irAEs风险，而不影响抗肿瘤作用的方法，值得后续临床研究。
讨论
本文作者发现，在人和小鼠肿瘤组织中，PI3Kδ抑制通过减少Treg细胞的数量和活化肿瘤内CD4+和CD8+T细胞，导致TME细胞组成的实质性变化，其克隆扩增并显示增强的细胞毒性和细胞溶解性特征。在小鼠模型中，作者发现结肠Treg细胞亚群的转录特征和组成发生了重大变化，这表明PI3Kδ抑制影响了Treg的功能、生存和组织保留，从而改变了肿瘤和非肿瘤组织中Treg细胞频率或Treg亚型组成。这些治疗介导的变化，特别是表达IL10的ST2Treg细胞的减少，与结肠炎以及结肠组织中致病性TC17和TH17细胞亚群扩增有关。值得注意的是，这些发现可能具有更广泛地适用性，因为组织驻留的ST2Treg细胞已在许多非肿瘤器官中被认为经常受irAEs的影响(例如，在皮肤中)或可能受其他靶向Treg细胞的免疫疗法的影响(例如，抗CTLA-4)。作者在小鼠模型中表明，PI3Kδi的间歇性给药是一种合理的治疗策略，既有持续的抗肿瘤免疫又降低了毒性。
作者的数据表明，PI3Kδi的免疫调节作用需要在未接受治疗的患者中进行审慎评估。很明显，在HNSCC患者的新辅助治疗中，在每日给与评估剂量时，PI3Kδ抑制剂的安全性较差，频繁引发的3/4级严重irAEs限制了可行性和临床效益，可能是由非肿瘤组织中Treg细胞的行为调节驱动的。基于作者的研究结果，在实体瘤治疗中有必要减少剂量或改变PI3Kδi治疗方案，以达到既诱导的明确的抗肿瘤免疫反应，同时限制健康组织中减少Treg细胞所带来的相关的不良反应。最后，作者的数据表明，每个患者的TME中效应细胞与调节细胞的独特组成可能是PI3Kδ抑制疗效的重要决定因素。因此，PI3Kδi可能对肿瘤内Treg细胞水平高的，以及预治疗样本中Treg与CD8+肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)比例不理想的患者中特别有用。作者的研究为进一步探索PI3Kδ抑制剂作为实体瘤中的免疫调节剂奠定了基础。
具体详细的材料和方法以及补充资料见：